白英不同生 期不同 用部位 原酸与咖啡酸及芦丁含量 定

 

舒翔¹ ，  ¹ ，林世和² ， 岱¹ ，余南才²

 

( 武 市第一医院 1．科; 2． 中心  室，430022)

 

摘    要 目的 探 白英不同生 期不同 用部位 原酸、咖啡酸及芦丁含量， 确定其最合适的采收季 提供理

 

依据。方法 于 5，6，7，8，9，10，11 月采集白英根、茎、叶、果 品，采用高效液相色 法 定。色 条件: Angilent Zorbax ODS C₁₈ 色 柱( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，柱前加保 柱; 流 相 乙 -1% 醋酸溶液，梯度洗脱; 流速: 0． 6 mL·min ^{－ 1} ; 柱温:25 ; 波 327 nm。 果 白英根、茎、叶、果 等不同部位 原酸含量均 高，含量符合以下 律: 果 ＜ 下部茎 ＜ 根 ＜ 上部茎 ＜ 叶; 不同生 周期根、茎中 原酸: 根部位 8 月达到最高 ( 2． 583 mg·g ^{－ 1} ) ，下部茎 9 月达到最大( 2． 762 mg·g^-1 ) ，上部茎中 8 月达到最大( 1． 788 mg·g ^{－ 1} ) ; 叶中 原酸、咖啡酸、芦丁含量均 高，原酸在 11 月叶中达到峰 ( 8． 169 mg·g ^{－ 1} ) ，咖啡酸在 8 月叶中达到峰 ( 0． 397 mg·g^-1 ) ，芦丁在 11 月叶中达到峰

 

( 3． 777 mg·g ^{－ 1} ) 。白英不同 用部位不同生 期 原酸、咖啡酸及芦丁含量随着生  育 程而 生 化，

 

合考 ，以 8 ～ 9 月枝叶茂盛    采收，有效成分含量最高。

 

关   白英;  原酸; 咖啡酸; 芦丁;  用部位; 生 期; 含量 定

 

中 分 号        R286; R927． 1       文献    A                    文章 号 1004 － 0781( 2012) 08 － 1062 － 03

 

 

Determination of Chlorogenic Acid，Caffeic Acid and Rutin in Different Medicinal Parts and Growth Stages of Solanum lyratum Thunb．

 

SHU Xiang¹ ，CHEN Jun¹ ，LIN Shi-he² ，XIE Dai¹ ，YU Nan-cai² ( 1． Department of Pharmacy; 2． Central Laboratory，First Hospital of Wuhan，Wuhan 430022，China)

 

ABSTRACT    Objective   To study contents of chlorogenic acid，caffeic acid and rutin in different medicinal parts and

 

growth stage of Solanum lyratum Thunb． and to provide a theoretical basis for confirming an optimal recovery season．   Methods The root，stem，leaf and fruit samples were collected from May to November．  High performance liquid chromatography

 

( HPLC) method was used． The Angilent Zorbax ODS C₁₈ columm ( 4． 6 mm × 250 mm，5 μm) was used． The detection wavelength was 327 nm． The mobile phase consisted of acetonitrile-1% acetum，and the flow rate was 0． 6 mL·min ^{－ 1} ． The

 

column temperature was set at 25 ． Results Chlorogenic acid in different medicinal parts of Solanum lyratum Thunb． was comparatively abundant，the distribution of chlorogenic acid content met the following rules: fruit ＜ upper part stem ＜ root ＜ under part stem ＜ leaf． The maximum values of chlorogenic acid at different medicinal parts were as follows: 2． 583 mg·g ^{－ 1} in the root at August，2． 762 mg·g ^{－ 1} in the under part stem at August，1． 788 mg·g ^{－ 1} in the upper part stem at september． The content of chlorogenic acid，caffeic acid and rutin in the leaf was comparatively abundant． The maximum value of caffeic acid in the leaf was 0． 397 mg·g ^{－ 1} at August． The maximum values of rutin and chlorogenic acid were 3． 777 mg·g ^{－ 1} and 8． 169 mg·g ^{－ 1} at November，respectively． Conclusion The contents of chlorogenic acid，caffeic acid and rutin change as Solanum lyratum Thunb． grows and develops． The active constituent content is most abundant in the leafiness Solanum lyratum Thunb． harvested at August or September．

 

KEY WORDS Solanum lyratum Thunb． ; Chlorogenic acid; Caffeic acid; Rutin; Medicinal parts; Growth stage; Determination

 

《中 大辞典》 白英“一般于 5 ～ 6 月或 9 ～ 11

 

收稿日期    2012 － 02 － 13    修回日期 2012 － 02 － 28

 

基金    目  ^*   武     市      生局        床医 学科研基金

 

( WZ10A01)

 

作者 介 舒翔( 1978 － ) ，男，湖北英山人，  ，学士，主要从事中 材及中 制 的 量 准研究。E － mail: flyingshu @ tom． com。

 

通 作者 林世和，男，湖北 田人，副主任 ， 士，主要从事中 材 及 中 制 的 量 准 研 究。E-mail: linshihe1974@ 126． com。

 

 

［1］

月 割取全草” ，但并无 代  数据支持 一。本  建立同  定白英叶中 原酸、咖啡酸及

［2］

芦丁 3 种成分含量的方法 ，并探 白英各 用部位不同生 期 3 种成分含量。 道如下。

 

1      器与

 

1． 1	器 Varian PS 240 高效液相色: Prostar
335	UV   器，Model 240 四元 ，Model 500 柱温箱，

 

Varian PS 240 工作站( 美国瓦里安公司) ; 十万分之一子天平( 德国 Sartorius) 。

医2012 年 8 月第 31 卷第 8 期	·1063·

 

 

1． 2                     原酸 照品( 批号: 110753-200413，供

 

含量 定用) 、咖啡酸 照品( 批号: 110885-200102，供含量 定用) 、芦丁 照品( 批号: 100080-200306) 均 于中国 品生物制品 定所。乙 色 ，水 重蒸水，其他  均 分析 。白英根、茎、叶、果 品均自采于湖北省 田 ， 武 市第一医院中心室余南才主任 定 茄科茄属植物 Solanum lyratum Thunb． 的根、茎、叶、果等。

 

2     方法与 果

 

2． 1  色 条件与系 适用性色 柱: Agilent

 

Zorbax C₁₈ 色 柱( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，柱前加保 柱。乙 流 相 A，1% 醋酸 流 相 B，按表 1 梯度洗脱，流速 0． 6 mL·min ^{－ 1} ，柱温 25 ， 波

 

327 nm， 20 μL。理 板数按 原酸峰、咖啡酸、芦丁 算均不低于 2 000。 原酸、咖啡酸、芦丁与其

 

他 分峰分离度均 ＞ 1． 5。

 

表 1  流 相比例

 

Tab． 1 Gradient elution ratio of mobile phase

 

/		流 相 A	流 相 B
	min		%
0	～ 12	12→20	88→80
12	～ 17	20	80
17	～ 29	20→25	80→75
29	～ 37	25→45	75→55
37	～ 45	45→12	55→88

 

2． 2      照品溶液的制          取 原酸 照品 5． 40 mg，

 

置 25 mL 量瓶，用适量甲醇溶解并稀 至刻度， 匀，即得 0． 216 g·L^-1 原酸 照溶液; 取咖啡酸 照品

 

5． 38 mg，置 25 mL 量瓶，用适量甲醇溶解并稀 至刻度， 匀，即得 0． 215 2 g·L ^{－ 1} 咖啡酸 照溶液; 取芦丁 照品 10． 91 mg，置 25 mL 量瓶，用适量甲醇溶解并稀 至刻度， 匀，即得 0． 436 4 g·L ^{－ 1} 芦丁 照溶液。分 取 原酸、咖啡酸 照品溶液各 5 mL，芦丁照品溶液 6 mL，置 25 mL 量瓶，用适量甲醇溶解并

［3］

稀 至刻度， 匀，即得 3 种 照品混合溶液        。

 

2． 3 供 溶液的制         取脱脂后的白英叶干燥粉末

 

(       30 目 ) 2 g，精密称定，置100 mL  底 瓶，加入 90% 乙醇 40 mL，80 水浴回流提取 2 次，每次

 

1  h，合并提取液，减 蒸干。残渣用 90% 甲醇溶解，

 

移至 50 mL 量瓶，并用 90% 甲醇定容， 匀后用微

［4］

孔 膜           ，即得 。

 

2． 4      性关系考察  分 精密量取混合 照溶液

 

0． 5，1． 0，2． 0，4． 0，6． 0，8． 0 mL，置10 mL 量瓶，用甲醇

 

 

稀 至刻度，配制成不同 度 照品溶液，分 取 照品溶液 20 μL，注入高效液相色 ，依法 定，色 。以峰面  分  坐 ( Y) ，  度横坐 ( X ) ， 制 准曲 。 果表明， 原酸在2． 16 ～ 43． 20 μg ·mL ^{－ 1} 范 内、咖啡酸在 2． 152 ～43． 04 μg·mL ^{－ 1} 范 内， 芦 丁 在 5． 237 ～104． 74 μg·mL ^{－ 1} 范 内呈良好的 性关系。回 方程 ， 原酸: Y = 84． 697 0X － 21． 032 7，r = 0． 999 5; 咖啡酸: Y = 149． 648 1X － 44． 289 5，r = 0． 999 8; 芦丁:

 

Y = 33． 278 0X + 9． 996 9，r = 0． 999 2。

 

2． 5 精密度              精密吸取混合 照品溶液 6 mL，

至 10 mL 量瓶，加90% 乙醇至刻度， 匀，吸取20 μL，

 

注入高效液相色 ，重复 6 次， 色 峰面。 算得 原酸、咖啡酸、芦丁峰面  RSD 分2． 07% 、1． 35% 、1． 24% ，表明 器精密度良好。

 

2． 6 定性 取“2． 3” 供 品溶液，室温放置，分 于 0，4，8，12，16，24 h ，参照“2． 1” 色 条件分析，每次 20 μL， 色 峰面 。 算得原酸、咖啡酸、芦丁峰面  RSD 分 1． 51% ，1． 89% ，1． 72% ，表明供 品溶液在室温 24 h 内 定。

 

2． 7 重复性              取白英 6 月叶，同批干燥粉末(

 

30 目 ) 6 份，按“2． 3” 方法平行制 6 份供 溶液。精密吸取 20 μL， 分析， 原酸、咖啡酸、芦丁色 峰面 ，外 法 算含量。 原酸、咖啡酸、

 

芦丁平 均 含 量 分0．		546	5，0．  140  0，
0． 405 2 mg·g － 1 ，RSD  分		1．	60% ，1． 74% ，
1． 87% 。表明方法重复性良好。
2． 8  加 回收率	称取已知含量的白英 6 月叶
干燥粉末(  30 目 )	1 g(  原酸、咖啡酸、芦丁含
量分0． 546 5，0． 140 0，0． 405		2 mg·g － 1 ) 5 份，精

 

密称定，分 精密加入 0． 216 g·L^-1 原酸 照溶液2． 50 mL，0． 215 2 g·L^-1 咖啡酸 照溶液 0． 65 mL，0． 436 4 g． L ^{－ 1} 芦丁 照溶液0． 95 mL，按“2． 3” 方法制 供 溶液并 定含量，分 算 品加 回收率，果 表 2 ～ 4。 原酸平均加 回收率 99． 05% ，RSD = 1． 29% ; 咖啡酸平均加 回收率 100． 04% ，RSD =

 

1． 65% ; 芦丁平均加  回收率 99． 60% ，RSD = 1． 75% 。

 

2． 9 供 品含量 定 依据  含量的高低，取脱脂后的白英根、茎、叶、果干燥粉末( 30 目 ) 0． 5 ～

 

2． 0 g，精密称定。按“2． 3” 方法操作，供  溶液定容

 

至 50 mL，在“2． 1” 色 条件 分析， 算含量，果 表 5，6。

 

3        

 

从含量 定 果得知，白英根、茎、叶、果中均含有

·1064·                                                                                                                         Herald of Medicine Vol. 31 No. 8 August 2012

 

原酸、咖啡酸等有机酸， 含有芦丁等黄 成分。不同 用部位 原酸含量均 高，根、上部茎中 原酸

 

8 月份达最高，下部茎 9 月份达最大，其后含量降低。

 

果    10 月份达最高，11 月含量降低，与《中        大辞

［7］

典》 的苦茄生物碱含量 似，在叶中 原酸的含量是越来越高，11 月达到最大; 只有叶中咖啡酸、芦丁的含量 高，而根、茎、果中的含量甚微，几乎可忽略不 ，芦丁也是 11 月叶中达到峰 ，咖啡酸在 8 月叶中达到峰 ，其后也降低。

 

表 2   原酸加 回收率  ( n =5)

 

Tab． 2     The recovery results of chlorogenic acid( n =5)

 

取 量/	品含量	加入量	得量	回收率/
g		mg		%
1． 029 0	0． 562 3	0． 540 0	1． 094 5	98	． 56
1． 000 0	0． 546 5	0． 540 0	1． 091 5	100	． 93
1． 043 0	0． 570 0	0． 540 0	1． 101 8	98	． 48
0． 999 3	0． 546 1	0． 540 0	1． 084 3	99	． 67
1． 023 2	0． 559 1	0． 540 0	1． 086 3	97	． 63

 

 

 

表 3  咖啡酸加 回收率  ( n =5)

 

Tab． 3 The recovery results of caffeic acid( n =5)

 

取 量/	品含量	加入量	得量	回收率/
g		mg		%
1． 029 0	0． 144 0	0． 140 0	0． 281 8	98	． 43
1． 000 0	0． 140 0	0． 140 0	0． 282 9	102	． 07
1． 043 0	0． 146 0	0． 140 0	0． 284 2	98	． 71
0． 999 3	0． 139 9	0． 140 0	0． 282 0	101	． 50
1． 023 2	0． 143 2	0． 140 0	0． 282 5	99	． 50
	表 4  芦丁加 回收率  ( n =5)
Tab． 4  The recovery results of rutin( n =5)
取 量/	品含量	加入量	得量	回收率/
g		mg		%
1． 029 0	0． 416 9	0． 414 6	0． 829 2	99	． 45
1． 000 0	0． 405 2	0． 414 6	0． 820 8	100	． 24
1． 043 0	0． 422 6	0． 414 6	0． 831 1	98	． 53
0． 999 3	0． 404 9	0． 414 6	0． 809 6	97	． 61
1． 023 2	0． 414 6	0． 414 6	0． 838 1	102	． 15