党参
本品为本品为桔梗科植物党参 Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf.、素花党参Codonopsis pilosula Nannf.var. modesta (Nannf.) L. T. Shen或川党参Codonopsis-
tangshen Oliv.的干燥根。秋季采挖,洗净,晒干。
【处方用名】 党参、米党参、蜜党参。
【规范方法】 党参 取原药材,除去芦头,洗净,润透,切厚片,干燥。
米党参 取大米置锅内,用文火加热,倒入党参片.炒至大米呈老黄色时,取出,筛去米,放凉。
每党参片100kg 用大米20k。
蜜党参 取炼蜜用适量开水稀释后。加入党参片拌匀,闷透,置锅内,用文火加热,炒至黄棕色,不粘手时取出放凉。
每党参片100kg,用炼蜜20kg。[1]
【药典方法】 除去杂质,洗净,润透,切厚片,干燥。[2]
【量化方法】
1.片厚 生品 蜜制品 米炒品
2.化学成分 党参主要成分是皂苷和糖,多切成段状使用,用测定比重、光电比色、折光率、煎出物的结果表明:煎液浓度高则比重、吸光度、折光率大,煎出物亦多,片与段头煎有非常显著差异,二煎数据相近,总煎出量片比段将近多1倍,故认为以切片应用为宜。[3]
【成品性状】 党参 为正反面各带有1/3栓皮的厚片(俗称阴阳片),栓皮有致密的环状横纹,呈灰白色,纵切面有裂隙或菊花纹,中央有黄色圆心,周边淡黄白色,质泡松且韧,有特殊香气,味微甜。
米党参 形如党参片,栓皮呈灰褐色,中央黄色圆心与周边淡黄白色均不太明显而呈黄褐色。质脆,香气稍缓。
蜜党参 形如党参片,栓皮呈棕褐色,中央黄色圆心与周边淡黄白色均不太明显而呈黄棕色。质脆,具蜜香,味甜。[4]
【鉴别】
1. 显微鉴别
本品横切面:木栓细胞数列至10数列,外侧有石细胞,单个或成群。皮层窄。韧皮部宽广,外侧常现裂隙,散有淡黄色乳管群,并常与筛管群交互排列。形成层成环。木质部导管单个散在或数个相聚,呈放射状排列。薄壁细胞含菊糖。[2]
党参粉末 淡黄色。(1)淀粉粒呈类球形,直径3-25um,脐点呈星状或裂隙状。(2)石细胞呈方形、长方形或多角形,壁不甚厚。(3)节状乳管碎片甚多,直径16-24um,含淡黄色颗粒状物。(4)网纹导管易察见。亦有具缘纹孔导管。(5)有菊糖,用水合氯醛装置(不加热),可见菊糖团块呈扇形,表面现放射状纹理。
2.理化鉴别
取粉末1g ,置带塞三角瓶中,加乙醚10ml,密塞,振摇数分钟,冷浸1小时,滤过。滤液置蒸发皿中,挥去乙醚,残渣加1ml 醋酐溶解,倾取上清液于干燥试管中,沿管壁加入硫酸1ml,两液接界面呈棕色环,上层蓝色立即变为污绿色。(检查皂苷及植物甾醇) [5]
3.紫外光谱鉴别
3.1取药粉1g,加水10ml,煮提(60水浴中)10分钟,过滤,取滤液2ml,置试管中并将试管塞紧,用力振摇1分钟。结果:产生明显的持久性泡沫. [6]
3.2分别取各药粉末1g,置试管中.加无水乙醇l0ml,浸渍15分钟,过滤。取滤液2ml,置紫外光灯(365nm)下观察,结果:显灰绿色光。[7]
4.红外光谱 将党参样品5g粉碎使其全部过120目筛,于60℃干燥至恒重,溴化钾压片,测定其红外光谱,结果见图。党参在1054.88cm-1和1052.96cm_1处有吸收
峰,峰形宽且吸收度强(73%)。[8]

5.薄层层析
取党参5g,加95%乙醇30ml回流提取2h,滤过,滤液浓缩挥发去除乙醇。残渣用5ml蒸馏水溶解,用正丁醇25ml(10,10,5m1)萃取3次,提取液用10ml水洗后分离浓缩至干。残渣用3ml甲醇溶解,点样于硅胶G板上,以正丁醇-乙酸乙酯-水(4:1:5)展开,取出晾干,层析板在荧光灯365nm处无斑点,10%H2SO4喷雾,120℃加热5min显色后有三个斑点。(甾体成分)
【检查】 有机氯类农药残留量[9]
色谱条件: 进样口温度250℃,检测器温度280℃,柱升温程序为初始温度150℃,以15℃/min升至180℃保持1min,以10℃/min升至210℃保持2min,以150℃/min升至240℃保持10min;载气为高纯氮(纯度>99.9999%),进样量1uL,外标法定量。
样品溶液的制备 取样品于60℃干燥4h,粉碎,过四号筛。精密称取1.0g于烧杯中,加入35加乙腈35mL,高速搅拌5min,真空抽滤,将滤液转移至分液漏斗中,加入10mL石油醚,振摇1-2min,加入1mL饱和氯化钠溶液和60mL水,剧烈混合30-45s。待分层后,弃去水层,用10mL水将醚层洗两次,弃去水层。提取液中加入1mL浓硫酸,振摇数下后,将分液漏斗倒置,打开活塞放气,然后振摇半分钟,静置分层,弃去下层溶液,上层溶液由分液漏斗上口倒入另一分液漏斗中,用少量石油醚洗原分液漏斗,洗液并入另一分液漏斗中,加10ml2%硫酸钠溶液,振摇后静置分层,弃去水层。用滤纸吸除分液漏斗颈内外的水,然后将石油醚经盛有2g无水硫酸钠的漏斗过滤,并以石油醚洗涤盛有无水硫酸钠的漏斗数次,洗液并入滤液中,将滤液挥干。残渣用石油醚溶解并定容至1.0ml,即为供试品液。
【含量测定】
1. 高效液相色谱法
1.1阿魏酸的含量[10]
色谱条件 色谱柱:Discovery C18 ,5um,250mm,4.6mm。流动相:乙睛-0.5%冰醋酸水溶液(20:80)。流速:0.8m1/min。检测波长:335nm。柱温:室温。进样量10ul。
对照品溶液的配制 精密称取阿魏酸对照品用甲醇溶解得对照品溶液。
样品溶液的制备 精密称取药材细粉1g,加甲醇l0m1,超声提取30min,滤过。滤渣用甲醇洗涤2次,每次5m1。合并滤液,置70℃水浴上蒸干。残渣加5%碳酸钠水溶液1Om1溶解,转入分液漏斗中,用乙醚洗涤2次,每次25m1;弃去乙醚相,水相用盐酸调pH值为1-2后,再用乙醚萃取3次,每次20m1;合并乙醚相,水浴蒸干,残渣用甲醇溶解并定容于1Om1量瓶中,离心,上清液作为样品供试液。
1.2苍术内酯Ⅲ含量[11]
色谱条件 色谱柱KromasilC18(250mmX4.6mm,5um),流动相为甲醛水(60:40),流速0.8mL/min,检测波长:220nm,灵敏度:0.01AUFS,进样量20uL。
对照品溶液的制备 对照品溶液:精密称取苍术内酯Ⅲ对照品用甲醇溶解制成每1mL含0.102mg的溶液,备用。
内标溶液的制备 精密称取尼莫地平对照品用甲醇溶解制成0.0408mg/ml的溶液,备用。
党参粉末供试溶液的制备 取样品粉末约2g,精密称定,置于具塞三角瓶中,加入50mL甲醇,超声30min,过滤,减压回收甲醇,残渣用20mL水溶解,用氯仿提取(20mLX3),收集氯仿层,挥干,残渣用甲醇溶解,加入0.5mL内标溶液,并用甲醇定容于5mL容量瓶中。用微孔滤膜过滤,弃去初滤液,取续滤液20uL做HPLC分析。
2.薄层扫描法
2.1测定党参甙Ⅰ的含量[12]
条件 展开剂:正丁酵-冰醋酸-水(7:l:1),扫描条件:s=270nm,n=360hm,反射法锯齿扫描,狭缝2×2mm,SX=7.
对照品的制备 精密称取党参甙Ⅰ对照品适量,加50%甲醇配成2mg/ml的溶液。
样品制备 精密称取党参粉末约4g,置索氏提取器中,加入5Oml甲醇回流提取至无色,水浴浓缩至少量,加适量水,上大孔树脂柱,水洗脱至无色,弃去水液,再用50%甲醇洗脱,收集洗脱液120ml,减压回收溶剂近干,定量转移置2ml容量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀。
测定 用毛细管点样器分别点对照品溶液2、4μl与样品溶液适量(约相当于标准品5~6μg)于同一薄层板上,吹干后,置展开剂饱和的层析缸中,以上行法展开约10cm,取出,挥尽溶剂,在254nm紫外检测器下确定斑点位置,进行扫描测定,根据对照品与样品的扫描面积,按外标二点法计算含量(n=4)。
2.2植物甾醇葡萄糖苷(A)的含量测定[13]
条件 硅胶G板,展开剂:氯仿-乙酸乙醋-甲醇-甲酸(40:5:7:0.2),显色剂:10%硫酸乙醇溶液。测定波长为525nm,反射法锯齿扫描,SX=3,狭缝1.25X1.25mm灵敏度2,使用背景较正。
对照品溶液的制备 将对照品A用氯仿-无水乙醇(1:1)溶解,制成每lml含0.4mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 精密称取粉碎过40目筛的党参样品约5g,加入50%甲醇60m1,超声处理30min,过滤,滤液(其中未检出A)弃去。用80m1水洗涤样品,使其全部转移置滤纸上,60-70℃干燥,并使成松散状,连同滤纸一起装入索氏提取器内,用氯仿-甲醇(1:1)适量回流提取5h,提取液蒸干,用氯仿-无水乙醇(1:1)溶解转移至5m1量瓶中并稀释至刻度,即得。
样品测定 将样品分别按拟定方法制备供试品溶液,精密吸取5-10μl与对照品溶液8μl交替点于薄层板上,展开,显色,扫描,按外标一点法计算含量。
2.3蒲公英萜醇乙酸酯(B)的含量测定[13]
条件 自制硅胶G板,以环己烷-苯-乙酸乙酯(20:30:1)为展开剂.单波长反射法锯齿扫描,入=550nm;狭缝0.6×0.6mm;背景补偿,线性校正CH=l,SX=3;扫描速度10mm/min。C—R1B仪:峰宽0.5,斜率l5000,最小峰面积20。
供试品溶液及操作同2.2。
2.4蒲公英萜醇(C)与植物甾醇(D)的相对含量测定[14]
条件 高效硅胶G预制板,展开剂:S1:环己烷-乙酸乙酯(50:1)能较好地分离化台物A、B;用溶剂系统S2:环己烷一乙酸乙酯(4:1)能满意地分离化合物C、D。显色:用岛津喷雾器,以10%硫酸乙醇溶液(加水30%)为显色剂均匀喷雾,空气中放置15分钟后,110℃烘烤5分钟显色。单波长反射法锯齿扫描,入=550nm;狭缝0.6×0.6mm;背景补偿,线性校正CH=l,SX=3;扫描速度10mm/min。C—R1B仪:峰宽0.5,斜率l5000,最小峰面积20。
精密称取粉碎过40目筛,并在60℃干燥至恒重的潞党参约2g,加入氯仿50ml,超声30分钟后,过滤,药渣以少量氯仿洗3次,回收氯仿,残渣用氯仿-甲醇(1:1)溶解并稀释至2ml。分别吸取供试品溶液5-10μl点于同一块硅胶G薄层板上,扫描测定.因标准曲线通过原点,本试验选用外标一点法为定量测定方法。lOcm×lOcm的薄层板上间隔点2个同样量的对照品溶液和3个样品溶液。用S1展开测定A、B的峰面积值,用S2展开测定C、D的峰面积值,并计算样品含量。以1990年采集2年生潞党参斑点面积积分值为100%,计算其它样品中C和D的相对含量,其斑点位置用上述A和B的水解产物确定。
3.分光光度法
3.1测定党参单糖及多糖的含量
3.1.1试剂及标准溶液的制备
铜试剂:取酒石酸钠6g,无水碳酸钠12g,碳酸氢钠8g,分别溶于100ml蒸馏水中,再将3份溶液混合均匀。另取硫酸铜2g溶于100ml蒸馏水中,待溶解后,加入上述混合液中,再加无水硫酸钠90g使溶解,置沸水浴中加热20min,放冷,过滤。滤液稀释至500ml,于20℃以上保存,备用。
砷钼酸试剂:取钼酸铵25g,溶于450ml蒸馏水中,缓缓加浓硫酸22ml,混匀。另取砷酸氢二钠3g,溶于25ml蒸馏水中,与钼酸铵液混匀于37℃保温48h后使用。
葡萄糖标准溶液配制:精密称取恒重的葡萄糖适量,加蒸馏水制成每1ml含约0.15mg的溶液,即得。
单糖供试品溶液的制备:精密称取党参粉末(40目)约0.25g,分别置100ml量瓶中,加甲醇25ml浸泡过夜。超声振荡15min,放冷,加蒸馏水至刻度,混匀,过滤。精密量取续滤液5.0 ml,于25ml量瓶中,加蒸馏水至刻度,混匀,作为单糖的供试品溶液。
多糖供试品溶液制备:精密称取上述各党参粉末(40目)约0.25g,分别置三角瓶中,加2%的盐酸溶液25ml,置水浴中回流40min,取出,放冷。定量转移至100ml量瓶中,加甲基红指示剂1滴,用10%氢氧化钠溶液中和至淡黄色,加蒸馏水稀释至刻度,混匀,过滤。精密量取续滤液2.0 ml,置25ml量瓶中,加蒸馏水至刻度,混匀,作为多糖的供试品溶液。
供试品的测定 准确吸取单糖及多糖供试品溶液各0.5ml,分别置25ml量瓶中,加水补足到1ml,准确加入1.0m1铜试剂,塞上塞子,于水浴中煮沸20min。取出,冷水中冷却5min,分别加入1.0 ml砷钥酸试剂,混匀,暗室放置25min后,于747士1 nm处测定吸光度。[15]
3.1.2标准溶液的配制 精密称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖加蒸馏水溶解制成每1ml含1mg的溶液,即得。
苯酚液的配制 取苯酚200g,加铝片0.2g和碳酸氢钠0.1g常压蒸馏,收集182℃馏份,称取此馏份32g加水使溶解,置500m1棕色容量瓶内稀释至刻度,放冰箱中备用。
样品溶液的制备 将各样品粉末(40目)60℃干燥1h,精密称取0.2g,置圆底烧瓶中,加80%乙醇150m1,置水浴90℃回流提取1h,趁热过滤,残渣用80%热醇洗涤(l0mlX3)。残渣连同滤纸置烧瓶中,加蒸馏水150ml,水浴90℃提取1h,趁热过滤,残渣及烧瓶用热水洗涤(lOmIX4),洗液并入滤液,放冷后移入250ml容量瓶中,蒸馏水定容,置冰箱中备用。
含量测定 精密吸取各供试液0.3m1于具塞试管中,加蒸馏水至2m1,各管再加入1.Oml苯酚试液,摇匀,迅速滴加浓硫酸各5.Oml,摇匀后放置5min,置沸水浴中加热15min,取出冷至室温,于490nm处测定吸收度,从回归方程中求出供试液中葡萄糖含量,按下式计算样品中的多糖含量。多糖含量(%)=(C.D.f/W)X100 式中C为供试液中葡萄糖浓度(μg/ml),D为供试液的稀释因素,f=1.042为换算因素,W为供试品重量。[16]
3.1.3标准葡萄糖溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品加适量水溶解,配成浓度为99.6ug/mL标准葡萄糖溶液备用。
5%苯酚溶液的配制 取苯酚100g,加铝片O.lg和碳酸氢钠0.05g,常压蒸馏,收集182℃馏分l0g,加蒸馏水200mL溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。
样品溶液的制备 精密称取党参各样品0.20g,用80%乙醇浸泡过夜,再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h,残渣挥去溶剂后,断续用水回流2h,反复洗至250ml容量瓶中,定容,摇匀成为样品液。
样品多糖含量测定 精密吸取各样品液1mL,于250mL容量瓶中,蒸馏水定容,摇匀,精密吸取此溶液1mL,另取1.OmL蒸馏水作空白对照,对试管再加入5%苯酚溶液1.6mL,摇匀,迅速滴加浓硫酸7.0mL,充分摇匀,室温放置26min,于490nm处测定吸光度,按下式计算多糖含量:多糖含量%=[CDF/W]100 式中,C为多样品溶液的葡萄糖浓度(μg/mL) , D为样品的稀释因素,F为换算因素,W为样品的重量(μg)。[17]
3.1.4多糖的提取及精制 称取党参样品100g,置500mL烧瓶中,将此烧瓶放入MCL-3型连续微波反应器中,依次用250mL石油醚(60-90℃)、乙醚和80%乙醇回流提取,调整功率为560,500,400,350W,反应时间20分钟。残渣挥干溶剂后,再放入MCL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20分钟,调整功率为630,600,560,450W。减压浓缩至一半体积,加入0.1%活性炭,脱色,过滤,滤液加入95%乙醇使溶液含醇80%,静置过夜,滤过,残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤,得党参多糖。60℃烘干备用。
含量测定同方法3. [18]
3.2测定党参中总黄酮、多糖的含量
3.2.1总黄酮含量测定
供试品溶液制备:精密称取党参粉约2g,置索氏提取器中,用石油醚(60℃一90℃)水浴回流脱脂2次(每次2h)。残渣挥干溶剂后,置锥形瓶中,加85%乙醇50mL浸泡12h,超声提取2次,每次30min.滤过,另用少量85%乙醇多次洗涤滤渣,并入提取液,并转入100mL量瓶中,用85%乙醇定容,即得测总黄酮的党参供试品液Ⅰ。
样品含量测定:精密吸取供试品液Ⅰ1.0mL,置10mL量瓶中,加5%亚硝酸钠0.4mL,放置6min后,加10%硝酸铝0.4mL,放置6min,再加4%氢氧化钠4mL,加水至刻度,摇匀,放置15min,进行全波长扫描,测定吸收度。计算出样品总黄酮的含量。
多糖含量测定
供试品溶液制备 将提尽黄酮后的党参残渣置100mL锥形瓶中,加80%乙醇50mL超声提取20min,以除去单糖及一些苷类。残渣挥干乙醇后,加水50mL超声提取30min后滤过,再加水50ml重复超声提取1次,合并两次提取液,然后定容于250mL量瓶中,即为测多糖的党参供试品液Ⅱ。
样品含量测定:精密吸取供试品液Ⅱ1mL,定量稀释10倍后,再精密吸取稀释液1mL,再分别加入5%苯酚溶液1.6 mL,摇匀,然后加浓H2SO4 7.0mL,充分摇匀,室温放置25min,同时做一空白。进行全波长扫描,测吸光度值,按下式计算多糖含量:多糖含量%=CDf/W X100。式中:C为样品溶液的葡萄糖的浓度(ug/m L), D为样品溶液稀释倍数,f为换算因素,W为样品质量(ug)。[19]
3.2.2样品溶液制备 取党参样粉约2g,精密称定,置索氏提取器中,用石油醚(60-90℃)水浴回流脱脂2次(每次2h)。残渣挥干溶剂后,置100ml烧瓶中,将此烧瓶放入MCL-3型连续微波反应器中,用85%乙醇回流提取,调整功率400W,反应时间20min。减压抽滤,另用少量85%乙醇多次洗涤残渣,并入提取液,并转入100ml容量瓶中,用85%乙醇定容,摇匀,即得测总黄酮的党参样品液。
将提尽黄酮后的党参残渣置100ml烧瓶中,放入MCL-3型连续微波反应器,用80%乙醇回流提取20min,调整功率400W,以除去单糖及一些苷类。党参残渣挥干乙醇后,再放入MCL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取3次(每次20min),调整功率560W。合并提取液,减压浓缩后,用蒸馏水定容至250ml,即为测多糖的党参样品液。
含量测定方法同方法1。[20]
4.滴定法测定单糖含量 [21]
取样切成0.2cm厚片,称取l0g,加水lOOml,浸30min后,加热保持微沸20min,滤取煎液,又加水lOOml煎煮,如此共5次.最后用热蒸馏水冲洗药渣,冲诜液与5次煎液合并,于容量瓶中稀释至500ml。每种制取3份,共15份备用。
量取煎液50ml,加5%盐酸5ml,在444.5kPa蒸气压力下加热水解1h,冷后滴加醋酸铅、碱式醋酸铅试液,充分沉淀其杂质,最后用饱和碳酸钠液调节,pH5~6,滤过,并用蒸馏水冲洗沉淀。洗液与滤液台并后.用容量瓶稀释至100ml,滴定标准的费林氏液.据被检液的消耗数,可计算出单糖含量。
5.示波极谱法
5.1测定党参铁元素含量[22]
吸取一定量的样品液(含铁量0.2-3μg),置于10m1小烧杯中,加人20%乙二胺及0.1mol/L酒石酸钾钠溶液各1.0m1,加水稀释至10.0m1,用JP-2型示波极谱仪二阶导数部分,自-1.5V起开始扫描,在-1.7V处测量铁的峰高,用标准加人法经扣除空白值后计算铁的含量。
5.2测定镉、铅含量[23]
吸取一定量的样品液于20m1小烧杯中,加0.01mol/LHgCI2,75ul.插人电极,通经纯化后的氮气除氧5min,予电解电位为-1.0V,电积时间为2nun,静止1min,然后以100mV/s扫描至-0.4V,分别在-0.76V和-0.55V处测量镉和铅的峰高,用标准加人法经扣除本空白值后计算镉和铅的含量。
样品测定:将党参样品经60℃干燥至恒重,标准参考物质桃叶在80℃干燥至恒重,精确称取一定量(约0.3g)试样.置于三角烧瓶中,加硝酸3m1放置过夜,然后在远红外电热板上微热至烧瓶中刚开始冒红棕色气体时,加HClO41ml,继续加热消化至溶液呈无色透明,蒸发至近干,加lmol/LHCl3m1,再加热至近干,最后用0.02mo1/LHCl-0.5mo1/LNaCl溶液定容至7.5m1,取一定量消化液,按实验方法进行镉、铅含量测定,扣除空白值.用标准加人法计算含量。
6.原子吸收光谱法
6.1测定不同炮制品中微量元素的含量[24]
试液的制备 样品经粉碎过20目筛,在60℃烘箱中烘4h,准确称取1.0000g于高型烧杯中,加入浓硫酸放置过夜,次日置电热板上低温消化,加过氧化氢、高氯酸等直至样液清澈透明,加温蒸发后,用去离子水温热提取残渣移至100m1容量瓶中定容摇匀后备用。取上述备用液经浓缩或稀释后,用火焰原子吸收光谱法分别测定Zn,Cu,Mn,Fe,Co,Ni,Li,Sr,Ca,Mg元素。
6.2 微量元素锌、铜、锰含量测定[25]
试样处理:将待测样品党参经60℃干燥至恒重,标准参考物质桃叶在80℃干燥至恒重。准确称取0.5g置三角烧瓶中加硝酸3ml,高氯酸1ml放置过夜,在电热板上加热消化至溶液呈无色澄清,蒸发至近干。加1mol/L盐酸3ml,再加热蒸发至近干,最后加0.5mol/L盐酸3ml,加热至沸,用去离子水定容至25ml,待测。偏振拉曼原子吸收分光光度计条件见表1。

7.分光光度法测定锗含量[26]
锗标准液:准确称取二氧化锗14.41mg,加入0.5g NaOH,用蒸馏水溶解,冷却后用1:1硫酸中和,过量0.05 ml,移入50ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,此贮备液浓度为200mg/L,用前配成1mgl/L的工作液。
苯基荧光酮乙醇溶液:准确称取0.0030g苯基荧光酮,溶于50ml无水乙醇和5ml1:6 硫酸中,用无水乙醇定容至100ml.溴化十六烷基三甲铵水溶液(1.0%):取2.000 g溴化十六烷基三甲铵,以蒸馏水定容至200ml。最大吸收波长选择于10ml比色管内加人锗标准工作液2.00ml、0.03%苯基荧光酮乙醇溶0.50ml、10%溴化十六烷基三甲铵水溶液0.50ml,1:1 H2SO41.00m1 ,蒸馏水稀释至刻度摇匀,20min后以试剂空白作参比比色,400nm-700nm处测定吸光度,绘制吸收曲线。配合物最大吸收峰位于460nm处,但试剂空白在此波长也有较大吸收。故选用空白试剂吸收较小,锗工作液吸收较大的505nm波长为测量波长。
样品处理 用洁净手术刀片把党参切片,用研钵磨碎,取1.000g,平行取3份。分别置于50ml烧杯中,加15mlHNO3浸泡过液,加人HNO3和HCIO4(4:1)10ml,于电热扳上加热,消化至溶液呈无色透明,近干时取下,冷却后用去离子水定容至10ml.
样品含量测定 分别移取上述消化液2.0 ml,按上法操作,为减少仪器测量误差,在比色管中加人适量锗标液(计算结果时扣除)。
8.岭回归-分光光度法测定痕量锰和锌[27]
于25m1容量瓶中加人一定量的锰、锌标准溶液,加缓冲溶液5.0m1,0.04%
5-Br-PADAP乙醇溶液2.0m1,20%TritonX-100溶液0.5m1,用水稀释至刻度,摇匀,放置20min,用lcm比色皿在500-600nm波长范围内对试剂空白间隔一定波长测定吸光度。
岭回归参数的选择 选用552、556、560、564、568nm5个波长作为测定波长。
试样分析 将党参洗净,研碎,105℃烘干,称取3.OOOg于200m1烧杯中,加人浓硝酸40m1,高氯酸l0ml,盖上表皿,放置3-4h后,加热消化至冒白烟,继续加热溶解并蒸至近干,稍冷,加入0.2mo1/L盐酸2m1溶解,加水适量,加热溶解,用NaOH溶液调至中性,冷至室温,过滤于100m1容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。移取试液5.Oml于25ml容量瓶中,依序加入1%抗坏血酸溶液,5%硫脲溶液和0.05%邻菲哆琳溶液各1.0m1, pH9.2缓冲溶掖5.0m1,0.1%DDTC溶液1.Oml,然后按实验方法加人显色剂及表面活性剂发色测定。
9. 分光光度法测定4种微量元素的含量[28]
供试液的制备 将党参用去离子水洗净,烘干,粉碎,过20目筛,称取1g样品粉末于瓷皿中,置于700℃马福炉中灼烧1h。冷却后用lm1浓HC1加热溶解至溶液呈透明,再用0.25mol/LHC1稀释至250.00ml。
测试方法 精密量取2.50m1党参测试液4份,分别置于25m1容量瓶中,各加入6mol/LFe标准溶液0.00,1.00,2.00,3.00m1,用乙醇稀释至刻度,摇匀。再精密量取5.00m1党参测试液12份,分别置于25m1容量瓶中,分别加入8mol/LZn标准液0.00,0.20,0.40,0.80 m1,6mol/LMn标准溶液0.00,1.00,2.00,3.00m1,5mol/LSe标准溶0.00,0.10,0.20,0.30m1,用乙醇稀释至刻度,摇匀。于仪器最佳工作条件下测定Fe,Zn,Mn, Se的吸光度,以标准曲线法定量。实验结果显示,党参中铁元素的含量最高,其次是硒、锌、锰。
【性味与归经】 甘,平。归脾、肺经。
【功能与主治】 补中益气,健脾益肺。用于脾肺虚弱,气短心悸,食少便溏,虚喘咳嗽,内热消渴。
【用法与用量】 9~30g。
【注意】 不宜与藜芦同用。
【贮藏】 置通风干燥处。防蛀。
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